Marubuta: Wang Xiaoyan, Zhao Eryu

Sashe: Asibitin Jiaozhou, Asibitin Dongfang mai alaƙa da Jami'ar Tongji

A halin yanzu, babban nau'in samfurin don gano pathogen nucleic acid na numfashi shine swab.Akwai nau'ikan hanyoyin adana samfurin da aka saba amfani da su, waɗanda duk suna buƙatar a sanya su cikin firiji ko daskarewa don sufuri da ajiya;Yana da wuya a sarrafa duk tsarin ƙananan zafin jiki yayin tattarawa da tsarin sufuri, kuma yana da wuya a tabbatar da ingancin kulawa kafin gwajin samfurin.^[1-2].

RNase (RNase) wani endonuclease ne wanda ke sarrafa RNA, galibi yana yanke haɗin haɗin phosphodiester tsakanin nucleotides.Kwayoyin RNase yana da ƙarfi sosai, akwai haɗin haɗin disulfide a cikin tsarin, kuma aikin sa baya buƙatar kasancewar cations na divalent, don haka RNase ba a sauƙaƙe ba, kuma yana da sauƙi a sake dawowa ko da bayan yawan zafin jiki ko amfani da denaturants.RNases an raba su zuwa endogenous da exogenous.Ana iya fitar da RNases na ƙarshe a lokaci guda lokacin da sel suka fashe.Don haka, kawar da rawar RNases na ƙarshe mataki ne mai matukar mahimmanci a cikin aikin hakar RNA.Exogenous RNases ana rarrabasu.RNases suna wanzuwa a cikin iska, fatar mutum, gashi da kuma yau, waɗanda dalilai ne masu mahimmanci na sauƙi na lalata RNA.^[3].

Tambayar bayanai

Canes-CL02-A009 "Aikace-aikacen Halin Likita da Ka'idodin Halitta A cikin Fasahar Kwayar cutar kwayoyin cuta ta yadda ya kamata a tsara cewa ya kamata a tsara matsayin ingancin ruwan sha da ya dace bisa ga aikace-aikacen;Akwatunan da za a iya zubarwa:

RNase/Rabi

(1) RNASA A

Ribonuclease A (RNase A), wanda aka samo daga pancreas na bovine, shine endoribonuclease wanda zai iya kai hari musamman akan 3′ ƙarshen ragowar pyrimidine akan RNA, yanke cytosine ko uracil wanda aka kafa ta kusa da nucleotides.Phosphodiester bond, samfurin ƙarshe na amsa shine 3′ pyrimidine nucleotide da oligonucleotide tare da 3′ pyrimidine nucleotide a ƙarshen.

(2) RNase T1

Ribonuclease T1 (RNase T1) an samo shi daga Aspergillus orjzae, yana aiki musamman akan 3'-terminal phosphate na guanine, kuma wurin tsagewa yana tsakanin 3' phosphate na guanine da 5' hydroxyl na kusa da nucleotides.Samfurin ƙarshe na amsa shine 3'guanylic acid da guntun oligonucleotide tare da 3'guanylic acid a ƙarshen.

(3) RNASA H

Ribonuclease H (RNase H) an fara gano shi daga naman maraƙi na thymus, kuma an haɗa kwayar halittar sa zuwa Escherichia coli.Yana iya ƙasƙantar da DNA musamman: igiyoyin RNA a cikin RNA hybrid duplexes, wanda ke haifar da oligonucleotides da mononucleotides tare da ƙarshen 3'-OH da 5'-monophosphate, ba zai iya ƙasƙantar da DNA guda ɗaya ko biyu ko RNA ba.

RNase

Aiki da amfani

Ribonuclease na iya haifar da lalacewar ribonucleic acid (RNA) kuma ana iya haɗa shi ta hanyar wucin gadi.Ana amfani da maganin shafawa a kai a kai don magance rauni da ciwon haɗin gwiwa.A cewar rahotanni, ribonuclease na iya canza ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar cuta ce ta hana ƙwayar cuta a cikin vitro, da kuma hana samuwar vaccinia da herpes a cikin embryos kaji.Yin amfani da asibiti na ribonuclease yau da kullun na allurar intramuscularly na 180 MG, mai amfani ga maganin cututtukan encephalitis na annoba, ribonuclease na iya haifar da lalacewar ribonucleic acid (RNA), kuma yanzu ana iya haɗa shi ta hanyar wucin gadi.Ana amfani da maganin shafawa a kai a kai don magance rauni da ciwon haɗin gwiwa.A cewar rahotanni, ribonuclease na iya canza ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar cuta ce ta hana ƙwayar cuta a cikin vitro, da kuma hana samuwar vaccinia da herpes a cikin embryos kaji.Yin amfani da asibiti na ribonuclease yau da kullun na allurar intramuscularly na 180 MG yana da fa'ida don maganin cututtukan encephalitis.

RNase

Ma'anar Mai hanawa

Ma'anar naúrar hanawar RNase: Adadin enzyme da ake buƙata don hana 50% na ayyukan 5ng RNase A raka'a ɗaya ce.

Yadda RNase Inhibitors ke Aiki

Guanidine isothiocyanate:

Guanidine isothiocyanate wani fili ne na kwayoyin halitta tare da tsarin kwayoyin C2H6N4S.Yafi amfani da nazarin halittu magani, sinadaran reagents, da dai sauransu Guanidine isothiocyanate ne mai gina jiki lysing wakili, kuma shi ne sau da yawa amfani a matsayin babban bangaren lysis bayani a cikin kwayoyin bincike reagents.Yana iya lyse nama, halakar da cell tsarin da dissociate nucleic acid daga nucleoprotein, kuma yana da karfi denaturation zuwa RNase.Shi ne mafi inganci mai hana RNase a halin yanzu.

TRIzol wani labari ne na jimillar hakar RNA wanda zai iya fitar da jimlar RNA kai tsaye daga sel ko kyallen takarda.Ya ƙunshi abubuwa irin su phenol da guanidine isothiocyanate, wanda zai iya rushe sel cikin hanzari kuma ya hana ƙwayoyin ƙwayoyin cuta da kwayoyin halitta suka saki.

(Duk da haka, guanidine isothiocyanate yana da haɗari ga lafiyar masu binciken lab.)

RNasin:

Acid glycoprotein da aka fitar daga hanta bera ko blastoderm na mutum.Rnasin shine mai hana RNase mara gasa, wanda zai iya ɗaure ga RNases daban-daban don kunna su.

(Ƙarin bayani: https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hyanayin zafi:

Yawan zafin jiki kuma hanya ce ta gama gari na denaturation na furotin.

Diethylpirocarbonate (DEPC):

DEPC shine mai hana RNase mai ƙarfi amma bai cika ba, wanda zai iya hana ayyukan RNase ta hanyar haɗawa da zoben amino acid imidazole na ƙungiyar RNase mai aiki don haɓaka sunadaran.

Vanadyl ribonucleoside hadaddun:

Wani hadadden da aka kafa ta hanyar vanadium oxide ions da nucleosides, wanda ke ɗaure zuwa RNase a cikin nau'ikan abubuwan canzawa, wanda kusan zai iya hana aikin RNase gaba ɗaya.

sauran:

SDS, urea, diatomaceous ƙasa, da sauransu kuma suna da wani tasiri mai hanawa akan RNase.

Sharhin Masana

Li Yujie babban masanin fasaha

Daraktan Sashen Laboratory, Asibitin Jiaozhou, Asibitin Dongfang mai alaƙa da Jami'ar Tongji

Don hana ɓarnawar ƙwayar cuta ta RNase, abin rufe fuska, safofin hannu da huluna ya kamata a sanya su kuma a maye gurbinsu akai-akai yayin aikin cirewar RNA.Dole ne a gasa dukkan kayan gilashi a cikin tanda mai bushewa a 200 ° C fiye da sa'o'i 2.Abubuwan da ake amfani da su don yin burodi, kamar filastik, ana buƙatar a yi musu amfani da ruwan DEPC, sannan a wanke su da ruwa mai narkewa.Reagents ko na'urorin da ake amfani da su don hakar, adanawa da gano RNA yakamata a keɓe su ga RNA, kuma yakamata a saita yankin aiki na RNA mai zaman kansa.

ambaton:

[1] Smith-Vaughan HC, Binks MJ, Beissbarth J, et al.Bacteria da ƙwayoyin cuta a cikin nasopharynx nan da nan kafin fara m ƙananan cututtuka na numfashi a cikin 'yan asalin Australiya [J].Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2018,37 (9): 1785-1794.

[2] Reshen Kula da Kamuwar Asibiti na Ƙungiyar Magungunan rigakafi ta kasar Sin.Sharuɗɗa don tattarawa da duba samfuran ƙananan ƙwayoyin cuta na asibiti [J].Jaridar Sinanci na Cutar Cutar Cutar, 2018 (20): 3192-3200.

[3] “Gwajin Asibiti Dubu Goma Me Ya sa Girman Gwajin Kwayoyin Halitta”